Σύγχρονες εφαρμογές της Μοριακής Βιολογίας στην εγκληματολογία

dc.contributor.author	Τσαμπαζλής, Ευστράτιος	el
dc.contributor.author	Κωστούλας, Γιάννης-Ρομανός	el
dc.date.accessioned	2015-02-17T15:44:05Z
dc.date.issued	2015-02-17
dc.identifier.uri	http://hdl.handle.net/11400/6434
dc.rights	Αναφορά Δημιουργού-Μη Εμπορική Χρήση-Όχι Παράγωγα Έργα 3.0 Ηνωμένες Πολιτείες	*
dc.rights.uri	http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/us/	*
dc.subject	Criminology
dc.subject	Genetic markers
dc.subject	Εγκληματολογία
dc.subject	Φασματομετρία
dc.subject	Δείγμα DNA
dc.subject	Γενετικοί δείκτες
dc.subject	Μοριακή Βιολογία
dc.subject	Spectrometry
dc.subject	DNA sample
dc.subject	Molecular Biology
dc.title	Σύγχρονες εφαρμογές της Μοριακής Βιολογίας στην εγκληματολογία	el
heal.type	bachelorThesis
heal.classification	Biology
heal.classification	Genetics
heal.classification	Βιολογία
heal.classification	Γενετική
heal.classificationURI	http://zbw.eu/stw/descriptor/15633-0
heal.classificationURI	http://zbw.eu/stw/descriptor/28854-5
heal.classificationURI	N/A-Βιολογία
heal.classificationURI	N/A-Γενετική
heal.keywordURI	http://zbw.eu/stw/descriptor/16196-5
heal.keywordURI	http://id.loc.gov/authorities/subjects/sh98007299
heal.dateAvailable	10000-01-01
heal.language	el
heal.language	en
heal.access	campus
heal.recordProvider	Τεχνολογικό Εκπαιδευτικό Ίδρυμα Αθήνας.Σχολή Επαγγελμάτων Υγείας και Πρόνοιας.Τμήμα Ιατρικών Εργαστηρίων.	el
heal.publicationDate	2010
heal.bibliographicCitation	Τσαμπαζλής, Ε. και Κωστούλας, Γ.Ρ. (2010) Σύγχρονες εφαρμογές της Μοριακής Βιολογίας στην εγκληματολογία. Πτυχιακή. Αθήνα: Τεχνολογικό Εκπαιδευτικό Ίδρυμα Αθήνα.	el
heal.abstract	Κάποιες συγκεκριμένες περιοχές του μη-κωδικού επαναλαμβανόμενου DNA, παρουσιάζουν μεγάλη ποικιλομορφία από άνθρωπο σε άνθρωπο. Αυτές οι περιοχές στην εγκληματολογία αποτελούν γενετικούς δείκτες και χρησιμοποιούνται για την ταυτοποίηση ατόμων. Εκτός από το γονιδιωματικό DNA στην εγκληματολογία αναλύονται και κάποιες υπερπολυμορφικές περιοχές του μιτοχονδριακού DNA για τον ίδιο λόγο, σε περιπτώσεις που η ανάλυση του γονιδιωματικού DNA δεν είναι δυνατή. Από τη γέννηση της γενετικής των πληθυσμών μέχρι σήμερα έχουν γίνει μεγάλα βήματα και έχουν επινοηθεί τεχνικές και μέθοδοι μοριακής βιολογίας, που χρησιμοποιούνται για την εξιχνίαση εγκλημάτων, με σημαντικότερη την αλυσιδωτή αντίδραση της πολυμεράσης (PCR). Τα αποδεικτικά στοιχεία DNA σε έναν τόπο εγκλήματος, μπορούν να βρεθούν σε πολλά διαφορετικά μέρη και με διαφορετικές μορφές. Είναι σημαντικό να εντοπιστούν και να συλλεχθούν με τις σωστές διαδικασίες και να μεταφερθούν στο εργαστήριο, διότι είναι μοναδικά και αναντικατάστατα. Σε αντίθεση, με τα δείγματα αναφοράς. Πηγή DNA στην ουσία αποτελεί κάθε εμπύρηνο κύτταρο. Με τις σύγχρονες εργαστηριακές τεχνικές είναι δυνατή η λήψη ενός ολοκληρωμένου προφίλ DNA από ένα μόνο κύτταρο. Το πρώτο βήμα στην ανάλυση του DNA είναι η απομόνωση του από το υπόστρωμα. Υπάρχουν διάφορα πρωτόκολλα για τον διαχωρισμό των κυττάρων από το υπόστρωμα, αυτό εξαρτάται από το είδος του στοιχείου. Καθώς και διάφορες τεχνικές απομόνωσης του DNA από τα κύτταρα. Μια ιδιαίτερη τεχνική απομόνωσης είναι η διαφορική εκχύλιση, ο σκοπός της είναι ο διαχωρισμός των σπερματικών κυττάρων σε περιπτώσεις σεξουαλικών εγκλημάτων. Το επόμενο βήμα στην ανάλυση είναι η ποσοτικοποίηση του DNA που απομονώθηκε. Στις περισσότερες σύγχρονες τεχνικές ανάλυσης η ποσότητα του DNA που θα χρησιμοποιηθεί είναι πολύ συγκεκριμένη. Η πιο σύγχρονη προσέγγιση ποσοτικοποίησης είναι η PCR, μια τεχνική γνωστή ως real-time PCR. Η πρώτη τεχνική ταυτοποίησης ατόμων που χρησιμοποιήθηκε, αναλύει τους πολυμορφισμούς που προκύπτουν μετά από πέψη με περιοριστική ενδονουκλεάση και εξετάζει τους ιδιαίτερα πολυμορφικούς τόπους, που καλούνται VNTR, με Southern Blot και υβριδοποίηση. Στην πτυχιακή εργασία αναφέρεται ένα λεπτομερές πρωτόκολλο εργασίας αυτής της τεχνικής ταυτοποίησης για εγκληματολογικούς σκοπούς. Σήμερα συνήθως, μετά από τον ποσοτικό προσδιορισμό του DNA στο δείγμα οι περιοχές του DNA που θα αναλυθούν πολλαπλασιάζονται με PCR. Στην παρούσα εργασία αναφέρονται τρόποι για την βελτιστοποίηση της PCR και για την αντιμετώπιση πιθανών προβλημάτων κατά τη διαδικασία της αντίδρασης. Επίσης εξετάζονται σύγχρονες προσεγγίσεις και αναφέρονται παραδείγματα από kit που είναι διαθέσιμα από εμπορικές εταιρίες, για την εφαρμογή PCR σε γονιδιωματικό και μιτοχονδριακό DNA. Καθώς η ανάλυση των STR τόπων αποτελεί την καθιερωμένη ανάλυση DNA για εγκληματολογικούς σκοπούς σήμερα, αναφέρονται οι τεχνικές απεικόνισης των STR τόπων μετά από την εφαρμογή της PCR, που έχουν αναπτυχθεί και οι τρόποι αυτοματοποίησης τους. Επίσης γίνεται η περιγραφή κάποιων συστημάτων που θα χρησιμοποιηθούν πιθανόν στο μέλλον. Στο δεύτερο μέρος της εργασίας περιγράφονται οι μέθοδοι της ανάλυσης του DNA στην εγκληματολογία. Περιγράφεται η ταυτοποίηση των VNTR τόπων που χρησιμοποιήθηκαν από την εγκληματολογία, η θεωρία αυτή της ανάλυσης και οι λόγοι που σήμερα η χρήση της είναι περιορισμένη. Αναφέρονται τα χαρακτηριστικά των STR τόπων και οι λόγοι που έχουν καθιερωθεί στην εγκληματολογική ανάλυση και λύσεις, που έχουν επινοηθεί, σε περιπτώσεις αποσυντεθειμένου ή μικρής ποσότητας DNA στο δείγμα και μεικτών δειγμάτων DNA με την ανάλυση STR τόπων στο χρωμόσωμα Υ. Σε πολλές χώρες του κόσμου έχουν καθιερωθεί βάσεις δεδομένων DNA, που στηρίζονται στην ανάλυση των STR τόπων. Σε αυτές τις βάσεις δεδομένων καταχωρούνται προφίλ DNA που προκύπτουν από συστήματα πολλαπλής PCR, που έχουν αναπτυχθεί γι αυτόν το λόγο. Γίνεται μια αναφορά στα χαρακτηριστικά των πολυμορφισμών μονού νουκλεοτιδίου (SNP) και στη συνέχεια περιγράφεται ο τρόπος ανάλυσης, τα χαρακτηριστικά και η χρησιμότητα του μιτοχονδριακού DNA στην εγκληματολογία.	el
heal.abstract	Polymorphic DNA regions that differ among individuals can be found throughout the non-coding regions of the human genome. Forensic science uses those regions as DNA markers in order to identify individuals. Besides genomic DNA some hypervariable regions of the mitochondrial DNA are analyzed for the same purpose, in cases where the analysis of genomic DNA is not possible. Since the birth of population genetics big steps have been made and have been developed molecular biology techniques and methods for forensic science investigations. The most significant of these is polymerase chain reaction (PCR). Crime scene DNA evidence can be found in many different places into the crime scene and in different forms. The proper procedures must be followed for the identification, collection and transport of the evidence to the laboratory, because they are unique and irreplaceable. In contrast, reference DNA samples can be recollected. Source of DNA is essentially any nucleated cell. Using modern laboratory techniques it is possible to produce a DNA profile from a single cell. The first step in DNA analysis is the isolation of DNA. Many protocols are available for the separation of cells from the substrate depending on the kind of evidence. There are also available many different methods and technologies for the isolation of DNA from the cells. A particular technique of DNA isolation is differential extraction which involves the separation of sperm cells and non-sperm cells and is used in sexual assault cases. The next step in the analysis is the quantification of the isolated DNA. The DNA analysis techniques currently being used in most laboratories require very precise amounts of DNA for processing. The most recent technique available for that purpose is the quantitative Real-Time PCR. The first DNA profiling technique used by forensic science was the detection of restriction fragment length polymorphisms generated at a number of highly polymorphic loci, which are termed VNTR loci. The detection involves hybridization of Southern blots. In this thesis a detailed protocol of this technique is involved. Nowadays, usually after sample’s DNA quantification the DNA regions that will be analyzed are amplified by PCR. This paper addresses ways of optimizing and troubleshooting PCR. Current approaches are examined and examples of genomic and mitochondrial DNA PCR taken from commercial kits are provided. Since the analysis of STR loci is the standard DNA analysis for forensic purposes today, the technology of STR typing after the application of PCR and ways of automation are indicated. Also there are described some systems that will be possibly used in the future. In the second part of this paper we describe the methods of DNA analysis used by forensic science. The profiling of VNTR loci used by forensic science is explained, involving the theory and the reasons its use is limited today. The characteristics of STR loci are listed as well as the reasons that they have been established into the forensic DNA analysis and solutions that have been developed, in cases of very low levels of DNA or degraded DNA in the sample and mixed DNA samples. In many countries around the world DNA databases based on the analysis of STR loci have been established. The profiles that are put on the databases derive from multiplex PCR systems that have been developed for this purpose. A reference to single nucleotide polymorphisms (SNP) is done, followed by a description of the characteristics and the utility of mitochondrial DNA in forensic science.	en
heal.advisorName	Σπανάκος, Γρηγόρης	el
heal.committeeMemberName	[χ.ό.]	el
heal.academicPublisher	Τμήμα Ιατρικών Εργαστηρίων	el
heal.academicPublisherID	teiath
heal.numberOfPages	150
heal.fullTextAvailability	true