Προκειμένου να αναπτυχθούν φαινοτυπικές μέθοδοι με αυξημένες δυνατότητες
αυτοματοποίησης και υψηλό πληροφοριακό περιεχόμενο που θα αντικαταστήσουν με
μικρό κόστος και ελάχιστες διαδικαστικές μεταβολές τις τρέχουσες διαδικασίες
μυκητολογικών στερεών καλλιεργειών, πέντε μύκητες καλλιεργήθηκαν σε 3 τυπικά
στερεά υποστρώματα και η ανάπτυξή τους καταμετράτο καθημερινά ως αύξηση της
διαμέτρου της αποικίας/μυκηλίου. Από τις τιμές προέκυψαν καμπύλες αύξησης
ημιδιαμέτρου-χρόνου και επιφανείας-χρόνου που περιγράφουν την μυκητιακή
ανάπτυξη, προκειμένου να διαπιστωθεί η κινητική της και να βγουν συμπεράσματα για
περεταίρω διαφοροποίηση της μεθόδου ώστε να περιγράφει το δυνατόν περισσότερους
μύκητες με επαρκή αναλυτικότητα και διακριτικότητα μέσω των παραστάσεων
ανάπτυξης. Γενικά η λογαρίθμηση της επιφανειακής ανάπτυξης προσεγγίζει καλύτερα
την τυπική σιγμοειδή καμπύλη, ενώ οι περισσότερες καλλιέργειες έχουν περάσει σε
φάση επιβράδυνσης εντός 24 ωρών από την νύξη. Ο καθορισμός της φάσης για
διαφοροποίηση του προγράμματος καταμετρήσεων μπορεί να εξαχθεί με μαθηματική
επεξεργασία της καμπύλης χωρίς εξειδικευμένο λογισμικό και γνώσεις και διέπεται από
απλούς κανόνες. Η καλλιέργεια κάθε στελέχους σε πολυθεσικά τρυβλία, εκτός από
μείωση του κόστους και του χρόνου καλλιεργειών, επιτρέπει την απολύτως ταυτόχρονη
ανάπτυξη του κάθε στελέχους σε διαφορετικά θρεπτικά υλικά με αποτέλεσμα απόλυτα
συγχρονισμένες γραφικές παραστάσεις και δυνατότητα αυτοματοποίησης και
μαζικοποίησης της αντίστοιχης διαδικασίας προς σύνταξη βάσεων δεδομένων με
αξιόπιστα περιγραφικά και αναλυτικά δεδομένα ανάπτυξης χωρίς χρήση πολύπλοκων
προγνωστικών μαθηματικών.
To develop automation-friendly and highly informative phenotypic methodologies, able
to replace with low cost and few procedures’ alterations current fungal solid-media
cultures, 5 fungi (3 moulds, 2 yeasts) were cultured onto 3 most common media (SbA,
MEA, CzA) at 250
C and 350
C. Growth was estimated daily as a function of diameter
increase of the mould mycelia/yeast colonies. The values were plotted by Microsoft
XL® commercial software to growth-time charts. Growth is expressed as half-diameter
increase, or as surface increase in both raw and logarithmic values. The resulting curves
describe the fungal growth so as to establish its kinetics for each isolate in specific
medium and temperature conditions and to conclude on possible alterations, in order to
achieve, by studying the resulting curves, more accurate description of the growth for
more fungi, with better discriminatory and analytical power. The logarithmic values of
fungal surface increase were closer to the standard sigmoid curve. Most cultures, though,
are already within the deceleration phase of growth after the first 24 hours. Criteria were
established to relate the computed, non-sigmoid growth curves to the standard sigmoid
curve and to determine its status whenever inconsistencies among the 4 curves plotted
for each culture emerged.
Using for each isolate in every temperature a single, multi-cell, multi-substrate Petri dish
lowers the cost and allows for virtually simultaneous growth on the different substrates.
The latter permits fully synchronized graphic charts, making possible the automated and
massive processing of isolates, thus leading to the compilation of databases containing
reliable descriptive and analytical growth data
without the use of complicated prognostic formulas.